細(xì)胞凋亡簡介

     細(xì)胞凋亡分為病理性凋亡和生理性凋亡兩種，生理性凋亡由遺傳控制，受既定程序（或基因）調(diào)控，屬于程序性的細(xì)胞死亡；病理性凋亡是非遺傳控制的細(xì)胞的意外壞死，區(qū)別于細(xì)胞壞死。

流式細(xì)胞檢測原理
 
   
     細(xì)胞凋亡時在細(xì)胞、亞細(xì)胞和分子水平上發(fā)生特征性改變。由于凋亡細(xì)胞核的改變，熒光染料對凋亡細(xì)胞的DNA可染性發(fā)生改變，主要是DNA可染性的降低。凋亡細(xì)胞形態(tài)的改變影響光的散射性，在流式細(xì)胞儀中，散射光有兩種：前散射光和側(cè)散射光，前散射光與細(xì)胞的大小有關(guān)，側(cè)散射光與細(xì)胞內(nèi)顆粒多少有關(guān)，反應(yīng)的是細(xì)胞內(nèi)光的散射情況。
      Annexin-V是一種分子量在35~#6kDa的鈣離子依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine PS）高親和力特異性結(jié)合，以標(biāo)記的FITC的Annexin-V作為探針，利用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。PI是一種核苷酸，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡的中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，PI能夠透過而使細(xì)胞核染成紅色，將Annexin-V與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開。
實驗室檢測流程

1、收集細(xì)胞
2、洗滌細(xì)胞
3、預(yù)冷的70%乙醛固定細(xì)胞
4、PBS細(xì)胞重懸
5、細(xì)胞過濾
6、PI染色，4℃避光30min
結(jié)果判斷

PI用氬離子激發(fā)熒光，激發(fā)光波長為488 nm，發(fā)射光波長大于630 nm，產(chǎn)生紅色熒光分析PI熒光強(qiáng)度的直方圖也可分析前散射光對側(cè)散射光的散點圖。

檢測示例

客戶提供

1、實驗信息，包括細(xì)胞類型，細(xì)胞處理藥物和條件。
2、實驗結(jié)果要求等。

服務(wù)流程

1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊討論項目細(xì)節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對實驗方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿意并達(dá)成一致，簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開展實驗，按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結(jié)題，提供實驗原始結(jié)果和分析結(jié)果、實驗流程、實驗條件等等。

我們的優(yōu)勢

1、提供各種實驗材料和儀器，滿足項目課題實驗需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實驗室。
4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系，全程跟進(jìn)，確保滿意。

咨詢與訂購

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